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免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是一項(xiàng)基于抗體特異性識(shí)別特定抗原的這一原理研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。免疫共沉淀常用于檢驗(yàn)生理狀態(tài)下蛋白質(zhì)間的相互作用,通過與質(zhì)譜(MS)聯(lián)用可以用于鑒定發(fā)現(xiàn)新的相互作用蛋白。百泰派克利用SILAC方法分別標(biāo)記實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞后進(jìn)行Co-IP實(shí)驗(yàn),依靠抗原與抗體之間的專一性反應(yīng)分離得到免疫復(fù)合物;再通過LC-MS/MS來定性/定量檢測(cè)免疫復(fù)合物中的蛋白;當(dāng)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組中某個(gè)蛋白質(zhì)的含量達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異時(shí),判定這個(gè)蛋白質(zhì)與研究的蛋白具有相互作用,可極大降低蛋白質(zhì)互作假陽性結(jié)果可能性。SILAC技術(shù)和Co-IP-MS技術(shù)結(jié)合可用于高通量定量分析在特定情況下蛋白的互作蛋白網(wǎng)。
SILAC 的聯(lián)用從源頭引入質(zhì)量差異,降低了實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)誤差,定量信息豐富,準(zhǔn)確度高。百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺(tái),Orbitrap Fusion質(zhì)譜平臺(tái),Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC,推出SILAC與免疫共沉淀質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析服務(wù)技術(shù)包裹(SILAC-based CoIP-MS),您只需要將您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康母嬖V我們并將您的細(xì)胞寄給我們,我們會(huì)負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜,包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞標(biāo)記、蛋白提取、抗體IP、效率檢測(cè)、蛋白酶切、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學(xué)分析。
• 盡量保留蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和翻譯后修飾
• 蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的,可以避免人為的影響
• 可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物
• 高通量,可快速全面分析所有相互作用的蛋白質(zhì)
• 可與對(duì)照組對(duì)比辨別非特異結(jié)合蛋白,低假陽性
• 能比對(duì)分析出各個(gè)互作蛋白的相對(duì)豐度
1.您只需使用干冰將凍存細(xì)胞寄給我們即可,同時(shí)保證細(xì)胞具有可以傳代培養(yǎng)5次以上的能力;
2.如果您需要自己標(biāo)記細(xì)胞并完成細(xì)胞的刺激等處理過程,您只需要將標(biāo)記完成并且經(jīng)過處理的細(xì)胞樣品或者蛋白樣品干冰寄給我們即可;對(duì)于每個(gè)樣品,需要保證至少含有300 ug蛋白總量。
注意:樣品運(yùn)輸請(qǐng)使用足量的干冰運(yùn)輸,并且盡量選用較快的郵遞方式,以降低運(yùn)輸過程中樣品降解的可能性。
在技術(shù)報(bào)告中,百泰派克會(huì)為您提供詳細(xì)的中英文雙語版技術(shù)報(bào)告,報(bào)告包括:
1. 實(shí)驗(yàn)步驟(中英文)
2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)(中英文)
3. 鑒定的蛋白質(zhì)的詳細(xì)信息
4. 質(zhì)譜圖片
5. 原始數(shù)據(jù)
6. 生物信息學(xué)分析
您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務(wù)完成:樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告
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